1996年，凭借偶像剧《真空爱情记录》出道 。2003年，因在琼瑶剧《还珠格格第三部：天上人间》中饰演夏紫薇一角而被大众所熟知 。2006年，凭借古装剧《乔家大院》获得第23届中国电视金鹰奖-观众喜爱的女演员奖 。2007年，因在青春励志剧《奋斗》中饰演夏琳一角而获得更多关注 ，还凭借该剧获得BQ红人榜-年度艺术红人奖等奖项 ；同年，凭借电影《江北好人》获得了第2届华鼎奖之中国年度影视表现最佳女演员奖等奖项 。2008年1月，马伊琍与演员文章领证结婚。2010年，凭借情感剧《婚姻保卫战》获得第1届亚洲彩虹奖之最佳女喜剧演员奖 。2011年，凭借情感剧《双城生活》获得了2011国剧盛典-年度最佳女演员奖 。 2013年，获得2012中国电视剧年度明星盛典的表演突破奖 。2015年，凭借都市剧《北上广不相信眼泪》获得第19届华鼎奖之中国百强电视剧最佳女主角 。2017年，凭借都市情感剧《我的前半生》获得第24届上海电视节白玉兰奖的最佳女主角等奖项 。2018年，凭借电影《找到你》获得第25届华鼎奖-中国电影最佳女主角等奖项 。2019年7月，马伊琍、文章宣布离婚 。2020年，获得第29届华鼎奖-中国近现代题材电视剧最佳女演员奖 。2021年，凭借电影《爱情神话》提名第33届华鼎奖之中国电影最佳女主角 。2023年4月，领衔主演电视剧《龙城》 。同年主演都市剧《繁花》 。